PG.NK细胞无血清冻存液产品介绍与使用说明
细胞冻存液产品说明书
【产品名称】
通用名称：细胞冻存液
英文名称：Persongen NK Cell Serum-free Cryopreservation Medium
商品名称：PG.NK细胞无血清冻存液
【包装规格】100ml/瓶
【预期用途】
仅用于人体细胞的低温冷冻保存，不具备对细胞的选择、诱导、分化功能，冻存后的细胞仅用于体外诊断，不用于人体回输。
【产品原理】
该冻存液含多种保护剂成分，其中一些小分子保护剂，可渗透至细胞内，与水分子发生水合作用，避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞。同时也含有非渗透性大分子保护剂，可优先结合细胞外的水分子，降低细胞外溶液的电解质浓度，从而减少阳离子进入细胞的数量，能够使细胞免受溶质的损伤，大大提高细胞复苏存活率。
【组成成分】
二甲基亚砜（DMSO）、人血白蛋白、复方电解质液；
【储存条件及有效期】
储存条件：2-8℃ 保存；有效期：12个月；
【适用仪器】无
【样本要求】
1.冻存操作开始前，需对冻存液、冻存管、冻存袋及冻存盒进行4℃预冷。冻存过程中，为减少冻存保护剂对细胞的伤害，样本因尽量保持低温。在冻存分装后，也要缩短室温存放时间，尽快开始冻存程序。
2.在复苏过程中，所使用的培养基需提前回温至室温。
3.建议在复苏当天，增加培养密度（如2×106-4×106个/ml），待细胞状态完全恢复后，再调整至适宜的培养密度。
【使用方法/操作步骤】
1. 细胞冻存流程
1.1 待冻存细胞需处在对数生长期，且活率≥90%。
1.2 混匀细胞悬液后取样计数，根据计数结果计算所需细胞悬液体积，将待冻存细胞悬液移入离心管中，300g离心5-10min。
1.3 弃上清，用2-8℃ 保存的PG.NK细胞冻存液重悬细胞沉淀至1-2x107个/ml。
1.4 分装冻存细胞液入冻存管/袋中。放入程序降温盒，置于-80℃冰箱（更推荐使用程序降温仪，以1℃/min的降温速率降温到-80℃）。
1.5 24h后，将-80℃保存的冻存管/袋移入液氮罐中。
2. 细胞复苏流程
2.1. 取出细胞冻存管/袋，37℃水浴快速解冻。
2.2. 待冻存细胞完全融化后，可直接用于功能检测或动物注射实验。
2.3. 如需继续培养，以1ml冻存细胞为例，在已解冻的细胞悬液中加入1ml细胞培养基，轻柔混匀后移至装有8ml NK细胞培养基的离心管中，300g离心5min。
2.4. 弃上清，加入适量新鲜培养基重悬细胞，轻柔混匀后移入事先准备好的培养容器中。
2.5. 根据研究需要进行常规培养。
【产品性能指标】
1. 外观：淡黄色澄清透明溶液。
2. 装量：应不低于标示装量。
3. pH值：7.5～8.0（25±2℃）。
4. 渗透压：1750±250mOmol/Kg
5. 无菌：应无菌生长。
6. 支原体：阴性。
7. 内毒素：＜5EU/mL。
【实验数据】
冻存相关数据
细胞复苏后24h，细胞活率恢复正常，细胞开始快速生长。PG.NK细胞无血清冻存液与90% FBS+10% DMSO冻存液相比，复苏后细胞活率相当，液氮保存和-80℃保存相比，细胞活率差异不大。
【注意事项】
1.请仔细阅读本说明书后方可操作。
2.使用时应注意包装标志，检查包装是否破损，如破损、漏液，则严禁使用。
3.本产品为一次性使用，不能重复使用，属于可回收废料，可交有资质废品厂商处理。
4.使用时，注意产品失效期，过期产品严禁使用。
5.使用后产生的废弃物应按照使用者所在单位、实验室管理规定处理；如果产品接触过传染性细胞样本，应当遵守相应法规，不得随意丢弃。
【基本信息】
生产企业：银河官方网站7163有限公司；
生产企业地址：安徽省合肥市高新区孔雀台路99号国家健康大数据产业园B2栋；
生产地址：安徽省合肥市高新区孔雀台路99号国家健康大数据产业园B2栋五楼；
联系电话：0551-65728070
网址：www.persongen.com；
【医疗器械备案凭证编号/产品技术要求编号】皖合械备20240074
【说明书核准及修改日期】2024-02-27
【生产批号及生产日期】详见包装标签。